Esprimere proteine regolatrici in cellule di mammifero
Il vettore di espressione CCNH contiene la regione codificante della proteina regolatrice CCNH umana. I vettori di espressione sono progettati per essere utilizzati con i vettori di fusione chinasi-NanoLuc® che contengono la regione codificante di una proteina di fusione chinasi-NanoLuc® (o NanoLuc®- chinasi). Il vettore di espressione e il vettore di fusione chinasi-NanoLuc® sono cotrasfettati nelle cellule prima di essere analizzati con l'appropriato NanoBRET™ Target Engagement Intracellular Kinase Assay. Questi vettori di espressione della proteina regolatoria sono forniti pronti per la trasfezione, con un promotore CMV che guida l'espressione della proteina regolatoria a lunghezza completa.
Per i dettagli sui vettori di fusione chinasi-NanoLuc® che richiedono la co-espressione con un vettore di espressione della proteina regolatoria, vedere il manuale tecnico del saggio NanoBRET™ Target Engagement Intracellular Kinase Assay Adherent Format, #TM598.
Dettagli sul vettore:
- Nome del gene: CCNH
- Sequenza
- Saggio raccomandato: NanoBRET™ TE Saggio di chinasi intracellulare, formato aderente
Informazioni sui nomi dei vettori di fusione delle chinasi
Il posizionamento di NanoLuc® a 5´ o 3´ del gene della chinasi è ottimizzato per l'uso con i saggi NanoBRET™ TE e si riflette nel nome del vettore. Ad esempio, NanoLuc®-kinase implica che NanoLuc® si trova a 5´ del gene della chinasi (all'N-terminus della chinasi). Analogamente, kinase-NanoLuc® implica che NanoLuc® è a 3´dal gene della chinasi (al C-terminus della chinasi).
Saggi di chinasi intracellulari NanoBRET™ Target Engagement (TE)
I saggi di chinasi intracellulare NanoBRET™ TE possono analizzare l'affinità dei composti in esame mediante lo spostamento competitivo di un tracciante fluorescente NanoBRET™ legato reversibilmente a una proteina di fusione NanoLuc®- chinasi nelle cellule. L'introduzione di composti di prova concorrenti determina una diminuzione dose-dipendente del segnale NanoBRET™ per stimare l'affinità intracellulare contro la proteina bersaglio. Il tracciante NanoBRET™ utilizzato è determinato dalla scelta del vettore di fusione della chinasi NanoLuc®. La tabella di selezione del vettore chinasi mostra quale saggio NanoBRET™ Tracer è corretto per ciascun vettore di fusione chinasi.
Protocols
No protocols available
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size | Concentration |
|---|---|---|---|
CCNH Expression Vector |
NV265A | 3 × 20μg | 1μg/μl |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
Resources
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