Saggi di attività chinasica

Le chinasi sono una delle famiglie di enzimi più importanti e ampiamente studiate nella ricerca biochimica e medica. Le chinasi catalizzano il trasferimento di fosfato dall'ATP a un'ampia varietà di substrati cellulari. Molti processi cellulari, come la segnalazione, la divisione e la crescita cellulare, lo sviluppo, la differenziazione e la morte cellulare sono orchestrati dalle chinasi. In condizioni fisiologiche normali, la regolazione delle chinasi è strettamente regolata. Tuttavia, in condizioni patologiche, le attività delle chinasi possono essere disregolate e l'interruzione delle reti di segnalazione intracellulare governate da questi enzimi porta a molte malattie, tra cui il cancro e l'infiammazione. Di conseguenza, le chinasi sono diventate un importante bersaglio per la scoperta di farmaci.

Data l'importanza degli inibitori delle chinasi come potenziali terapie, i ricercatori si sono affidati a tecnologie che monitorano i cambiamenti nelle attività delle chinasi e la loro modulazione da parte di inibitori a piccole molecole. I metodi di misurazione dell'attività delle chinasi basati sull'isotopia sono stati a lungo considerati il gold standard. Tuttavia, a causa di problemi di sicurezza e di gestione dei rifiuti, si sono cercati approcci alternativi. Il saggio ideale per le chinasi ha i seguenti attributi: 

• universale
• indipendente dal substrato
• scalabile
• rileva l'attività a bassi tassi di conversione del substrato 
• ampio range dinamico 
• bassi risultati falsi positivi

Con questi obiettivi, abbiamo sviluppato un saggio di rilevamento dell'ADP basato sulla luminescenza, ADP-Glo™ Kinase Assay, che misura l'attività della chinasi quantificando la quantità di ADP prodotta nella reazione della chinasi. In combinazione con i nostri sistemi enzimatici per chinasi, Promega offre una delle più ampie gamme di saggi biochimici completi per l'attività delle chinasi.