Il saggio GTPase-Glo™ misura l'attività della GTPasi rilevando la quantità di GTP rimanente dopo l'idrolisi del GTP in una reazione di GTPasi. Dopo la reazione di GTPasi, l'aggiunta del reagente GTPase-Glo™ converte il GTP rimanente in ATP, che viene convertito in un segnale luminescente con l'aggiunta del reagente di rivelazione.
L'attività di GTPasi, GAP e GEF è inversamente correlata alla quantità di luce prodotta. Una GTPasi molto attiva idrolizza una maggiore quantità di GTP, riducendo la quantità di ATP prodotta dal GTP e riducendo la produzione di luce. Una GTPasi meno attiva idrolizza meno GTP, lasciando una maggiore quantità di GTP da convertire in ATP e producendo più luce.
Il diagramma a sinistra mostra le GTPasi in fase attiva e inattiva in relazione a GDP e GTP. Il diagramma a destra è uno schema del protocollo del saggio GTPasi-Glo™.