Rilevazione bioluminescente del cAMP per monitorare l'attività dei GPCR
Il cAMP-Glo™ Max Assay è un test omogeneo, bioluminescente e ad alto rendimento per misurare i livelli di AMP ciclico (cAMP) nelle cellule. I composti che modulano i GPCR accoppiati all'adenilato ciclasi alterano tipicamente i livelli di cAMP intracellulare. Il saggio monitora i livelli di cAMP nelle cellule in risposta all'effetto di agonisti, antagonisti o composti di prova sui recettori accoppiati a proteine G (GPCR) e si basa sul principio che l'AMP ciclico (cAMP) stimola l'attività dell'oloenzima proteina chinasi A (PKA), diminuendo l'ATP disponibile e determinando una diminuzione della produzione di luce in una reazione di luciferasi accoppiata.
Formato migliorato per prestazioni migliori
Questa versione migliorata del saggio cAMP-Glo™ combina i tamponi di lisi e di reazione cAMP nel tampone cAMP-Glo™ ONE, semplificando il protocollo e velocizzando il saggio. Il tampone ONE è fornito in concentrazione 5X, il che offre una maggiore flessibilità per i volumi di coltura cellulare di partenza.
Il saggio cAMP-Glo™ Max consente di quantificare facilmente i livelli di cAMP in un'ampia gamma di tipi di cellule e può essere eseguito in piastre da 96, 384 o 1536 pozzetti. Le cellule vengono indotte con un composto di prova per un periodo di tempo appropriato per modulare i livelli di cAMP. Dopo l'induzione, le cellule vengono lisate e il cAMP rilasciato stimola la protein chinasi A nel reagente. Viene quindi aggiunto il reagente Kinase-Glo® per terminare la reazione della PKA e rilevare l'ATP rimanente mediante una reazione di luciferasi. Le piastre vengono lette con un luminometro a micropiastre. L'emivita del segnale luminescente è superiore a 4 ore, il che offre un tempo sufficiente per la lettura delle piastre ed elimina la necessità di utilizzare luminometri con iniettori di reagenti.
La confezione V1681 contiene reagenti sufficienti per 2 piastre (formato 96 o 384 pozzetti).
Il codice V1682 contiene reagenti sufficienti per 20 piastre (formato 96 o 384 pozzetti).
La Cat.# V1683 contiene reagenti sufficienti per 200 piastre (formato 96 o 384 pozzetti).
produzione di cAMP nelle cellule e il saggio cAMP-Glo™ Max.
Schema della produzione di cAMP nelle cellule e del test cAMP-Glo™ Max.
Veloce e facile da usare
- Miglioramento delle fasi di lisi e rilevazione del cAMP combinate (cAMP-Glo™ ONE Buffer).
- La concentrazione ONE Buffer-5X offre una maggiore flessibilità per i volumi di coltura cellulare di partenza.
- Il test viene completato in circa 30 minuti.
Eccellente rapporto segnale/rumore
- Il miglior rapporto segnale/sfondo di tutti i saggi cAMP.
- Segnale:sfondo >200 (con cAMP), >15 (su cellule).
Tecnologia di luminescenza comprovata
- Alimentato dalla luciferasi ricombinante Ultra-Glo™.
- Nessuna interferenza da parte di composti fluorescenti.
- Non radioattivo.
Protocols
Complete Protocol
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
Protein Kinase A |
V135A | 1 × 20μl |
|
cAMP-Glo™ ONE Buffer |
V166A | 1 × 2.5ml |
|
MgCl2, 1M |
V330A | 1 × 1ml |
|
cAMP, 1mM |
V642B | 1 × 100μl |
|
Kinase-Glo® Substrate |
V672A | 1 × 1 vial |
|
Kinase-Glo® Buffer |
V673A | 1 × 10ml |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
U.S. Pat. No. 7,700,310 and other patents and patents pending.
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size | Concentration |
|---|---|---|---|
|
Protein Kinase A |
V135B | 1 × 200μl | |
|
cAMP-Glo™ ONE Buffer |
V166B | 1 × 20ml | |
|
MgCl2 |
V330B | 1 × 5ml | 1M |
|
cAMP, 1mM |
V642A | 1 × 500μl | |
|
Kinase-Glo® Substrate |
V672B | 1 × 1 vial | |
|
Kinase-Glo® Buffer |
V673B | 1 × 100ml |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
U.S. Pat. No. 7,700,310 and other patents and patents pending.
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size | Concentration |
|---|---|---|---|
|
Protein Kinase A |
V135B | 10 × 200μl | |
|
cAMP-Glo™ ONE Buffer |
V166B | 10 × 20ml | |
|
MgCl2 |
V330B | 4 × 5ml | 1M |
|
cAMP, 1mM |
V642A | 6 × 500μl | |
|
Kinase-Glo® Substrate |
V672B | 10 × 1 vial | |
|
Kinase-Glo® Buffer |
V673B | 10 × 100ml |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
U.S. Pat. No. 7,700,310 and other patents and patents pending.
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