cAMP-Glo™ Assay
Simple, Bioluminescent cAMP Detection
- Complete in ~45 minutes
- Scalable to 1536-well plate formats and beyond
- No interference by fluorescent compounds
Catalog Number:
Size
Catalog Number: V1501
Catalog Number: V1502
Monitoraggio dell'effetto dei composti in esame sui GPCR
Il saggio cAMP-Glo™ è progettato per monitorare la produzione di cAMP in risposta agli effetti dei composti in esame sui recettori accoppiati a proteine G (GPCR). I GPCR che si accoppiano con l'adenilato ciclasi aumentano o diminuiscono il cAMP intracellulare. Il saggio si basa sul principio che l'AMP ciclico (cAMP) stimola l'attività dell'oloenzima proteina chinasi A (PKA), diminuendo l'ATP disponibile e determinando una diminuzione della produzione di luce in una reazione di luciferasi accoppiata.
Il saggio cAMP-Glo™ può essere eseguito in piastre da 96, 384 o 1536 pozzetti. Le cellule vengono indotte con un composto di prova per un periodo di tempo appropriato per modulare i livelli di cAMP. Dopo l'induzione, le cellule vengono lisate per rilasciare il cAMP, quindi viene aggiunta la soluzione per la rilevazione del cAMP, che contiene la proteina chinasi A. Viene quindi aggiunto il reagente Kinase-Glo® per terminare la reazione della PKA e rilevare l'ATP rimanente mediante una reazione di luciferasi. Le piastre vengono lette con un luminometro a micropiastre. La luminescenza può essere correlata alle concentrazioni di cAMP utilizzando una curva standard di cAMP. L'emivita del segnale luminescente è superiore a 4 ore. Questa prolungata emivita del segnale elimina la necessità di luminometri con iniettori di reagenti e consente l'elaborazione in modalità batch di più piastre.
La confezione V1501 contiene reagenti sufficienti per eseguire 300 dosaggi a 60μl di volume finale per pozzetto in piastre da 384 pozzetti.
La confezione V1502 contiene reagenti sufficienti per eseguire 3.000 dosaggi a 60μl di volume finale per pozzetto in piastre da 384 pozzetti.
Segnale eccellente: sfondo
Il saggio fornisce il miglior rapporto segnale/ sfondo di tutti i saggi cAMP; segnale/ sfondo >200 (con cAMP), >15 (su cellule).Tecnologia di luminescenza comprovata
Grazie alla luciferasi ricombinante Ultra-Glo™, il test cAMP-Glo™ basato sulla bioluminescenza offre un'alternativa sicura ai metodi radioattivi ed evita le interferenze che possono essere problematiche per i metodi basati sulla fluorescenza.
produzione di cAMP nelle cellule e il test cAMP-Glo™.
Rappresentazione della produzione di cAMP nelle cellule e del test cAMP-Glo™.
Protocols
Complete Protocol
Quick Protocols
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
Protein Kinase A |
V135D | 1 × 16μl |
|
cAMP-Glo™ Lysis Buffer |
V151A | 1 × 5ml |
|
cAMP-Glo™ Reaction Buffer |
V152A | 1 × 8ml |
|
cAMP, 1mM |
V642B | 1 × 100μl |
|
Kinase-Glo® Substrate |
V672A | 1 × 1 vial |
|
Kinase-Glo® Buffer |
V673A | 1 × 10ml |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
U.S. Pat. No. 7,700,310 and other patents and patents pending.
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
Protein Kinase A |
V135C | 1 × 160μl |
|
cAMP-Glo™ Lysis Buffer |
V151B | 1 × 25ml |
|
cAMP-Glo™ Reaction Buffer |
V152B | 1 × 50ml |
|
cAMP, 1mM |
V642B | 1 × 100μl |
|
Kinase-Glo® Substrate |
V672B | 1 × 1 vial |
|
Kinase-Glo® Buffer |
V673B | 1 × 100ml |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
U.S. Pat. No. 7,700,310 and other patents and patents pending.
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