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w6110lumithmgb1humanmouseimmunoassay3 w6112lumithmgb1humanmouseimmunoassay3 w140a-c-lumit-hmgb1-human-positive-control

No-Wash Immunoassay for HMGB1 Detection

  • Fast add-and-read assay performed directly on cells
  • Detects human or mouse HMGB1
  • Luminescent detection with just a plate-reading luminometer

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Rilevamento rapido e senza lavaggio di HMGB1

L'High-Mobility Group Box 1 (HMGB1) funziona come un modello molecolare associato al danno (DAMP) rilasciato dalle cellule nelle risposte infiammatorie. L'HMGB1 è spesso misurato come biomarcatore chiave della morte cellulare immunogenica, una forma specializzata di morte cellulare che provoca una risposta immunitaria. L'HMGB1 funziona anche come citochina proinfiammatoria. I metodi attuali per rilevare l'HMGB1, come l'ELISA, richiedono noiose fasi di lavaggio e lunghi protocolli. La tecnologia Lumit™ semplifica la quantificazione di HMGB1 con un protocollo di aggiunta-miscelazione-misurazione completato in 90 minuti o meno.

Come funziona il Lumit™ HMGB1 Immunoassay

Gli anticorpi primari contro HMGB1, selezionati per il loro rilevamento specifico e sensibile, sono marcati con le subunità LgBiT e SmBiT della luciferasi NanoBiT®. In presenza di HMGB1, le subunità si uniscono per formare un enzima luciferasi attivo. L'aggiunta di un substrato ottimizzato genera un segnale di luminescenza luminosa proporzionale ai livelli di HMGB1. Il test rileva sia l'HMGB1 umano che quello di topo.

How the lumit HMGB1 assay works.

Protocollo semplice a una piastra, senza fasi di lavaggio

Lumit® Immunoassay Workflow

Ampia gamma dinamica di rilevamento di HMGB1

Data l'omologia di HMGB1 umano e murino, il kit può essere utilizzato per entrambe le specie con minime differenze di prestazioni.

Lumit™ HMGB1 Mouse Immunoassay standard curve.
Lumit™ HMGB1 Human Immunoassay standard curve.

Obiettivo

HMGB1 umano

HMGB1 di topo

Limite di rilevamento 
(3SD sopra il fondo)

1ng/ml 

3ng/ml 

Intervallo dinamico

4-1.000ng/ml

3-2.187ng/ml

Tempo di analisi

90 minuti

Tipo di campione

Campioni di coltura cellulare

SD=Deviazione Standard

Misure di DAMP doppi in una linea cellulare umana

Data showing ATP release and HMGB1 release after mitoxantrone treatment

In piastre di saggio parallele, le cellule U937 sono state somministrate con mitoxantrone e sono state analizzate per il rilascio di ATP extracellulare (a sinistra) in modo cinetico nell'arco di 24 ore, utilizzando il metodo di misurazione della concentrazione di ATP. RealTime-Glo™ Extracellular ATP Assay. I reagenti del Lumit™ HMGB1 Immunoassay sono stati aggiunti direttamente alla seconda piastra di cellule trattate dopo 24 ore di trattamento. Il mitoxantrone produce un rilascio dose- e tempo-dipendente di ATP extracellulare (a sinistra) e un rilascio dose-dipendente di HMGB1 (a destra) con un accordo di potenza tra le due misurazioni dei pattern molecolari associati al danno.

Rilevare la morte cellulare immunogenica indotta da farmaci in diversi modelli di coltura cellulare

Drug-induced immunogenic cell death detected with HMGB1 assay.

Le cellule U2OS umane (a sinistra) e le cellule EL4 di topo (a destra) sono state trattate con doxorubicina per 24 ore. Dopo 24 ore, il Lumit™ HMGB1 Immunoassay è stato eseguito direttamente sui campioni di coltura cellulare per misurare l'HMGB1 rilasciato dalle cellule trattate.

Disponibile anche: Misurazione cinetica dell'ATP extracellulare in cellule vive

RealTime-Glo™ Extracellular ATP Assay  misura cineticamente il rilascio di ATP dalle cellule morenti, in modo da poter valutare l'induzione della morte cellulare immunogenica in tempo reale. Utilizzare questo test per integrare il Lumit™ HMGB1 Immunoassay per ottenere un quadro più completo della morte cellulare immunogenica.

Specifications

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What's in the box

Item Part # Choose a size

HMGB1 (Human) Positive Control

W140A 1 × 20μl

Anti-hHMGB1 mAb-SmBiT, 250X

W141A 1 × 50μl

Anti-hHMGB1 mAb-LgBiT, 250X

W142A 1 × 50μl

Lumit® Detection Substrate B

VB405A 1 × 160μl

Lumit® Detection Buffer B

VB406A 1 × 3.2ml

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Use Restrictions

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

Storage Conditions

BB

Patents and Disclaimers

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

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HMGB1 (Human) Positive Control

W140A 1 × 20μl

Anti-hHMGB1 mAb-SmBiT, 250X

W141A 5 × 50μl

Anti-hHMGB1 mAb-LgBiT, 250X

W142A 5 × 50μl

Lumit® Detection Substrate B

VB405A 5 × 160μl

Lumit® Detection Buffer B

VB406A 5 × 3.2ml

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U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

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