Viral ToxGlo™ Assay
Determine Viral CPE or Monitor Compounds for Antiviral Activity
- Easy, simple protocol measures ATP
- Quantifiable assay for measuring viral-induced cytopathic effect (CPE)
- Compatible with high-throughput screening
Catalog Number:
Size
Catalog Number: G8941
Catalog Number: G8942
Catalog Number: G8943
Il Viral ToxGlo™ Assay è un metodo semplice e quantificabile per determinare gli effetti citopatici (CPE) indotti dai virioni litici nelle cellule ospiti. Il saggio misura l'ATP cellulare come misura surrogata della vitalità della cellula ospite. Quando la CPE si verifica a causa di un'infezione virale, la deplezione di ATP può essere misurata e correlata alla carica virale. La quantità di ATP rilevata è direttamente proporzionale al numero di cellule ospiti vitali in coltura e può essere utilizzata come metodo semplice per quantificare la CPE indotta da virus. La procedura di analisi omogenea "add-mix-measure" prevede l'aggiunta del singolo reagente (ATP Detection Reagent) direttamente alle cellule ospiti dopo il trattamento virale. Viene generato un segnale luminescente di tipo "glow", proporzionale alla quantità di ATP presente. Per valutare la CPE non sono necessari lavaggi delle cellule, pipettaggi multipli e valutazioni visive. Il sistema rileva fino a 15 cellule/pozzetto in un formato a 384 pozzetti in 10 minuti dopo l'aggiunta e la miscelazione dei reagenti ed è progettato per l'uso in formati multipozzetto, rendendolo ideale per lo screening automatizzato ad alta produttività (HTS).
Caratteristiche e vantaggi
Quantificazione oggettiva del CPE: il test fornisce dati quantificabili attraverso la rilevazione della luminescenza, evitando così l'errore soggettivo dell'operatore associato ai metodi di valutazione visiva.
Riduzione del tempo per ottenere i risultati: I dati possono essere registrati e l'analisi può iniziare 10 minuti dopo l'aggiunta del reagente.
Semplificazione della valutazione dei CPE: il protocollo omogeneo "aggiungi-mescola-misura" riduce drasticamente le fasi manuali necessarie per la valutazione dei CPE.
Scegliete il vostro formato: Il reagente è scalabile da 96 a 1536 pozzetti.
Adatto allo screening ad alta produttività: Il segnale luminescente è molto stabile con un'emivita generalmente >di 5 ore, a seconda del tipo di cellula e del terreno di coltura utilizzato, consentendo l'elaborazione in lotti o in sequenza. L'assenza di interferenze di fluorescenza determina un elevato rapporto segnale/ sfondo e fornisce eccellenti valori Z′ nelle applicazioni di screening.
Le applicazioni comprendono la determinazione dell'infettività virale e della corrispondente dose infettiva in coltura tissutale (TCID50) e la potenziale potenza antivirale o la tossicità fuori bersaglio dei composti in esame.
Questo metodo è utile solo per i virus che producono citotossicità e CPE.
Misura quantificabile di CPE
L'aumento della luminescenza indica una minore quantità di virus infettivo e una minore quantità di CPE. Pannello A. Diluizioni di virus influenzale H1N1 sono state applicate a monostrati MDCK. Pannello B. Diluizioni di VEEV applicate a monostrati Vero E6. Pannello C. Diluizioni di virus della dengue applicate a monostrati BHK-21. Pannello D. Diluizioni di RSV applicate a monostrati A549. Dopo l'incubazione, il reagente per la rivelazione dell'ATP è stato aggiunto direttamente alle cellule e la luminescenza è stata misurata.
Calcolo accurato della tossicità dei composti in esame
Pannello A. Il composto del test riduce la CPE virale senza citotossicità fuori bersaglio. Cellule MDCK con 100 TCID50 di H1N1 (antivirale on-target) o solo cellule MDCK (citotossicità off-target). Pannello B. Il composto del test riduce la CPE virale e causa anche citotossicità fuori bersaglio. Monostrato di cellule BHK-21 con 100 TCID50 di virus Dengue (antivirale on-target) o solo cellule BHK-1 (citotossicità off-target). Dopo l'incubazione, il reagente per la rilevazione dell'ATP è stato aggiunto direttamente alle cellule e la luminescenza è stata misurata.
Protocols
Complete Protocol
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
ATP Detection Buffer |
G806A | 1 × 10ml |
|
ATP Detection Substrate |
V363A | 1 × 1 vial |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
ATP Detection Buffer |
G806A | 10 × 10ml |
|
ATP Detection Substrate |
V363A | 10 × 1 vial |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
ATP Detection Buffer |
G806B | 1 × 100ml |
|
ATP Detection Substrate |
V363B | 1 × 1 vial |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
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