Test di vitalità cellulare RealTime-Glo™ MT

Part Numbers: G9711, G9712, G9713

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Monitoraggio della vitalità cellulare in tempo reale

  • Risparmiare tempo, coltura cellulare e costi dei reagentiRilevare rapidamente i cambiamenti nella vitalità cellulare

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Test di vitalità cellulare RealTime-Glo™ MT
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Perché utilizzare il RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay?

Con il RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay è possibile monitorare continuamente la vitalità cellulare nello stesso pozzetto di campionamento fino a 72 ore, per ottenere maggiori informazioni sulla modalità d'azione di un trattamento in relazione alla dipendenza dal tempo e dalla dose. Il reagente del test può essere aggiunto alle cellule durante la fase di piastratura, durante il trattamento o al termine dello stesso. Non è necessario lavare le cellule, rimuovere il terreno di coltura o effettuare ulteriori aggiunte.

La natura non litica e la rapida risposta del saggio consentono di monitorare la vitalità cellulare nel tempo nello stesso pozzetto e permettono un facile multiplexing con altri saggi cellulari o applicazioni a valle. Il saggio misura il potenziale di riduzione delle cellule vitali ed è indipendente dall'ATP, fornendo un metodo ortogonale per la determinazione della vitalità o della citotossicità.

Scoprite come il RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay può essere utilizzato per valutare la tossicità dei farmaci negli organoidi.

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realtime-glo viability assay mechanism

Il test RealTime-Glo misura il potenziale di riduzione: Un indicatore ben consolidato della vitalità cellulare

Principio del test

Nel test RealTime Glo MT Cell Viability Assay si verifica una reazione non litica della NanoLuc Luciferasi nel terreno di coltura. La NanoLuc luciferasi e il substrato di vitalità cellulare MT vengono aggiunti al terreno di coltura cellulare. Il substrato di vitalità cellulare MT si diffonde quindi nelle cellule dove viene ridotto per formare un substrato NanoLuc, che esce dalla cellula e viene utilizzato rapidamente dalla luciferasi NanoLuc nel terreno di coltura. Solo le cellule metabolicamente attive possono ridurre il substrato e la produzione di luce è proporzionale al numero di cellule vive in coltura. Le cellule morte non possono ridurre il substrato.

realtime-glo detects live cells 12420MB-W

Risparmio di tempo, coltura cellulare e costi dei reagenti

Una piastra RealTime-Glo produce gli stessi dati di molte piastre di dosaggio end-point

Cinquecento cellule A549 sono state poste in terreno contenente i reagenti RealTime-Glo MT in piastre da 384 pozzetti e varie concentrazioni di bortezomib. Il segnale di luminescenza è stato determinato da ciascun pozzetto ogni ora per 72 ore in un lettore di piastre Tecan M200 con modulo di controllo del gas (37 gradi C/5 O2).

Real time live cell data collection 12466MF-W-a
bortezomib-live-dead-cell data-12466MF-W-b

I dati relativi a specifici punti temporali sono stati tracciati per calcolare l'EC50 in questi punti temporali.


Rilevare rapidamente le variazioni della vitalità cellulare

Il RealTime-Glo MT Cell Viability Assay genera un segnale luminescente che dipende dalla continua riduzione del substrato di vitalità cellulare MT da parte delle cellule vitali e dal rapido ricambio da parte della NanoLuc Luciferase. I saggi convenzionali basati sul potenziale riducente (alamarBlue, MTT) sono basati sull'accumulo e non consentono di rilevare in tempo reale la morte cellulare nello stesso pozzetto. In questo esperimento, le cellule A549 sono state trattate con l'1% di Triton X-100. I reagenti per il test di vitalità sono stati applicati e incubati per i tempi indicati dopo il trattamento.

12613MA

Aggiungere alle cellule al momento del piastrellamento, del dosaggio o dell'endpoint

Impostazione flessibile del test

Eseguite il monitoraggio della vitalità cellulare in tempo reale o il rilevamento degli endpoint. Siete voi a decidere come impostare il vostro test. Aggiungete il reagente RealTime-Glo alle cellule in qualsiasi momento in cui si desidera leggere la vitalità cellulare. Il test è compatibile con lo screening ad alta produttività in piastre da 96, 384 e 1536 pozzetti.

Realtime kinetic or endpoint viability methods 12474MB-W

Multiplex con altri test per maggiori informazioni per campione

Il RealTime-Glo Assay, non litico e a cellule vive, è compatibile con le applicazioni a valle e consente il multiplexing con altri saggi, conservando campioni preziosi e fornendo dati più informativi per campione.

Realtime-Glo viability data-etoposide-12573MD-W-a
Realtime-cytotoxicity-etoposide-data-12573MD-W-b

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