MultiTox-Glo Multiplex Cytotoxicity Assay
Un saggio di rivelazione bioluminescente e fluorescente
Il MultiTox-Glo Multiplex Cytotoxicity Assay è un saggio sequenziale ad aggiunta di reagenti, fluorescente e luminescente, che misura il numero relativo di cellule vive e morte nelle popolazioni cellulari. Il test misura in sequenza due attività proteiche: una è un marcatore di vitalità e l'altra è un marcatore di citotossicità. L'attività proteasica delle cellule vive è limitata alle cellule vitali intatte e viene misurata utilizzando un substrato peptidico fluorogenico permeabile alle cellule (GF-AFC). Questo substrato entra nelle cellule intatte, dove viene scisso dall'attività della proteasi a cellule vive per rilasciare AFC e generare un segnale fluorescente proporzionale al numero di cellule vitali. La proteasi a cellula viva diventa inattiva quando si perde l'integrità della membrana e si disperde nel terreno di coltura circostante.
Per misurare l'attività della proteasi a cellule morte, che viene rilasciata dalle cellule che hanno perso l'integrità della membrana, si utilizza un secondo substrato peptidico luminogenico, che è in grado di impermeabilizzare le cellule (AAF-aminoluciferina). L'aminoluciferina liberata viene misurata come luminescenza "tipo bagliore" generata dalla luciferasi ricombinante Ultra-Glo™ fornita nel reagente del saggio.
Il saggio MultiTox-Glo fornisce misure raziometriche, inversamente correlate, della vitalità cellulare e della citotossicità, che si correlano con i metodi consolidati per la misurazione della vitalità e della citotossicità. Il rapporto tra cellule vitali e cellule morte è indipendente dal numero di cellule e, pertanto, può essere utilizzato per normalizzare i dati. La presenza di misure complementari di vitalità cellulare e citotossicità riduce gli errori associati al pipettaggio e all'agglomerazione delle cellule, oltre a fungere da controllo interno per consentire l'identificazione degli errori derivanti dall'interferenza chimica dei composti in esame o dei componenti del terreno. La lettura luminescente consente di ridurre la probabilità statistica di falsi positivi (o falsi negativi) ed elimina i problemi di interferenza della fluorescenza.
La biologia del test di citotossicità MultiTox-Glo Multiplex
Il saggio MultiTox-Glo misura attività proteiche distinte e differenziate
Le misure di vitalità e citotossicità sono inversamente correlate e raziometriche
Note
Utilizzando 100μl per pozzetto in una piastra a 96 pozzetti, il Cat.# G9270 è sufficiente per eseguire 100 dosaggi; Cat.# G9271, 500 dosaggi; Cat.# G9272, 1.000 dosaggi. Utilizzando 25μl per pozzetto in un formato di piastra a 384 pozzetti, G9270 è sufficiente per eseguire 400 dosaggi; G9271, 2.000 dosaggi; G9272, 4.000 dosaggi.Protocols
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
Assay Buffer |
G146A | 2 × 5ml |
AAF-Glo™ Substrate |
G607A | 1 × 1 bottle |
|
GF-AFC Substrate |
G608A | 1 × 10μl |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
Assay Buffer |
G146A | 10 × 5ml |
AAF-Glo™ Substrate |
G607A | 5 × 1 bottle |
|
GF-AFC Substrate |
G608A | 5 × 10μl |
SDS
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Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
Assay Buffer |
G146B | 4 × 25ml |
|
AAF-Glo™ Substrate |
G607B | 2 × 1 bottle |
|
GF-AFC Substrate |
G608B | 2 × 50μl |
SDS
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Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
Resources
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