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J2380_LDH-Glo j2381 mg1010-myglo-2026-01

Simple, More Sensitive LDH Assay Method to Determine Cytotoxicity

  • Detects LDH release from small numbers of cells, including 3D cell models
  • Monitors cytotoxicity from the same sample over time
  • Provides more data per well through multiplexing with other cell-based assays
  • Integrates seamlessly with the MyGlo® Reagent Reader

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Monitoraggio della citotossicità da piccoli numeri di cellule

Il test di citotossicità LDH-Glo™ è un test bioluminescente su piastra per quantificare il rilascio di lattato deidrogenasi (LDH) nel mezzo di coltura in seguito a danno della membrana plasmatica. Il rilevamento bioluminescente è più sensibile dei metodi colorimetrici o fluorescenti e consente di rilevare con precisione la LDH da un numero ridotto di cellule, comprese le cellule primarie e le colture cellulari 3D.

Questo saggio LDH prevede la rimozione di una piccola quantità di terreno cellulare (2-5µl) da ciascun pozzetto trattato, consentendo di ottenere più dati campionando lo stesso pozzetto nel tempo e utilizzando il terreno e le cellule rimanenti per altri saggi basati sulle cellule.

Come funziona il test

La LDH rilasciata dalle cellule danneggiate catalizza l'ossidazione del lattato con la concomitante riduzione del NAD a NADH. La riduttasi utilizza il NADH e il substrato della riduttasi per generare luciferina, che viene convertita in un segnale bioluminescente da Ultra-Glo™ rLuciferase. Il segnale luminescente generato è proporzionale alla quantità di LDH presente.
Lactate dehydrogenase detection with LDH-Glo cytotoxicity assay 15079ma-w

"Il saggio LDH-Glo™ di Promega è un kit affidabile e facile da usare per misurare la morte cellulare. Lo usiamo nel nostro laboratorio e, rispetto ad altri, ci aiuta davvero a ottenere dati affidabili. Nel complesso, consigliamo vivamente questo kit".

Cliente LDH-Glo

Monitoraggio della citotossicità nelle colture cellulari 3D

Il saggio di citotossicità LDH-Glo™ è adatto per misurare la LDH rilasciata da un piccolo numero di cellule danneggiate dalla membrana. Ecco un esempio di misurazione della tossicità indotta da farmaci in sferoidi HCT116. Le misurazioni della tossicità in funzione del tempo sono state eseguite campionando ripetutamente il terreno dagli stessi pozzetti.
Measuring drug-induced toxicity in HCT116 spheroids using the bioluminescent ldh assay 15086mb-wb
Gli sferoidi HCT116 sono stati formati utilizzando 2.500 cellule/pozzetto in piastre Corning a 384 pozzetti a bassissimo attacco e trattati con Doxorubicina. 2,5µl campioni sono stati raccolti dagli stessi pozzetti ai tempi indicati e congelati in LDH Storage Buffer a una diluizione 1:10. I campioni sono stati scongelati e ulteriormente diluiti a 2:10. I campioni sono stati scongelati e ulteriormente diluiti 2,5 volte in LDH Storage Buffer prima di misurare i livelli di LDH.

Rilevare la citotossicità delle cellule bersaglio nei saggi ADCC

Il saggio di citotossicità LDH-Glo™ può essere utilizzato per valutare la morte cellulare dovuta a molti meccanismi d'azione dei trattamenti biologici, tra cui la citotossicità complemento-dipendente (CDC), la citotossicità cellulo-mediata anticorpo-dipendente (ADCC) e la citotossicità del coniugato anticorpo-farmaco. In questo esempio, il saggio LDH-Glo™ è stato utilizzato per rilevare l'uccisione ADCC delle cellule bersaglio con il biologico rituximab.
 
Detection of target cell cytotoxicity in ADCC assays using a bioluminescent ldh assay method 15087mb-wa
Le cellule sono state piastrate in un rapporto 20:1 Effettore (PBMC):Bersaglio (Daudi) e trattate con concentrazioni variabili di rituximab (RTX) in triplicato per 4 o 6 ore. Campioni di terreno (2,5µl) dagli stessi pozzetti sono stati rimossi e diluiti in LDH Storage Buffer (47,5µl) e congelati. 25µl di campioni scongelati sono stati aggiunti a un volume uguale di LDH Detection Reagent e la luminescenza è stata registrata dopo 60 minuti di incubazione a temperatura ambiente. La concentrazione di rituximab rispetto alla RLU è stata tracciata e i dati sono stati adattati alla curva 4PL per calcolare l'EC50
Detection of target cell cytotoxicity in ADCC assays using a bioluminescent ldh assay method 15087mb-wb
I valori RLU dei pozzetti di controllo (eseguiti sulla stessa piastra del trattamento con rituximab) indicano che il segnale luminescente delle sole cellule bersaglio o effettrici è minimo e che l'aggiunta di rituximab è necessaria per l'uccisione delle cellule. ADCC = Cellule effettrici Cellule bersaglio RTX. RLU = Unità di Luminescenza Relativa.

Specifications

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Reductase Substrate

G885A 1 × 55μl

Lactate Dehydrogenase

J195A 1 × 1 each

LDH Detection Enzyme Mix

J238A 1 × 10ml

Certificate of Analysis

Search by lot number

Use Restrictions

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

Storage Conditions

AA

Patents and Disclaimers

U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.

What's in the box

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Reductase Substrate

G885B 1 × 275μl

Lactate Dehydrogenase

J195A 1 × 1 each

LDH Detection Enzyme Mix

J238B 1 × 50ml

Certificate of Analysis

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Use Restrictions

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

Storage Conditions

AA

Patents and Disclaimers

U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.

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MyGlo™ Reagent Reader

  • USB Cable
  • Wall Power Adapter
  • Plug Adapters
MG1000 1 × 1 each

CellTiter-Glo® 2.0 Reagent

G9241 1 × 10ml View Product

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For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.