Il CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay è un metodo fluorometrico per stimare il numero di cellule non vitali presenti in piastre multipozzetto. Il test misura rapidamente il rilascio di lattato deidrogenasi (LDH) da cellule con membrana danneggiata. La LDH rilasciata nel mezzo di coltura viene misurata con un test enzimatico accoppiato della durata di 10 minuti che determina la conversione della resazurina in un prodotto fluorescente di resorufina. La quantità di fluorescenza prodotta è proporzionale al numero di cellule lisate utilizzando un formato a 96 o 384 pozzetti. Il Reagente CytoTox-ONE™ non danneggia le cellule normali e sane; pertanto, le reazioni impostate per misurare la LDH rilasciata possono essere eseguite direttamente in un formato omogeneo in pozzetti di analisi contenenti una popolazione mista di cellule vitali e danneggiate.
Il CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay, HTP (Cat.# G7892), offre una confezione alternativa e conveniente per l'elaborazione di più piastre. Ogni flacone di reagente fornito con il sistema è sufficiente per eseguire 500 dosaggi in un formato a 96 pozzetti o 2.000 dosaggi in un formato a 384 pozzetti quando si utilizzano i volumi consigliati.
Si risparmia tempo impostando il test in una piastra di coltura cellulare; in questo modo si elimina la fase di trasferimento del campione comune a molti test LDH. Le piastre vengono incubate per soli 10 minuti prima di leggere i dati, rispetto ai 30 minuti o più dei classici test LDH.
La capacità di multiplexing consente di eseguire più saggi su un unico campione con altri saggi omogenei basati su cellule di Promega.
Il protocollo di analisi può essere adattato alle proprie esigenze; le analisi completate possono essere lette per diverse ore dopo l'aggiunta della soluzione di stop fornita, mantenendo un buon segnale.