CellTox™ Green Cytotoxicity Assay
Real-Time Cell Death Assay With Multiplexing Compatibility
- Accurate cytotoxicity determination in exposures out to 72 hours
- Flexible protocol allows kinetic analysis or endpoint determination
- Multiplex with luminescent assays to obtain more data per well
Catalog Number:
Size
Catalog Number: G8741
Catalog Number: G8742
Catalog Number: G8743
Catalog Number: G8731
Monitoraggio della morte cellulare in tempo reale con il saggio di citotossicità CellTox™ Green
I saggi di citotossicità basati sulla rilevazione di biomarcatori rilasciati nel terreno di coltura possono sottostimare la citotossicità in caso di esposizioni a lungo termine di 72 ore o più, a causa della limitata stabilità del biomarcatore rilevato. Il saggio di citotossicità CellTox™ Green fornisce un metodo semplice, rapido e accurato per determinare gli effetti tossici durante o dopo l'esposizione a lungo termine delle cellule in coltura. CellTox Green può essere combinato con altri metodi in saggi multipli per determinare il meccanismo della tossicità ed è facilmente scalabile da 96 a 1536 pozzetti.
Scoprite come il saggio di citotossicità CellTox™ Green può essere utilizzato per valutare la tossicità dei farmaci negli organoidi.
Il colorante verde CellTox™ lega il DNA di cellule con integrità di membrana compromessa.
Eseguire misure di citotossicità cinetica per determinare l'inizio della tossicità
Aumento della citotossicità in funzione della dose e dell'esposizione
Nell'esperimento qui illustrato, il bortezomib ha causato una citotossicità apprezzabile nelle cellule K562 tra i punti temporali di 4 e 24 ore. La fluorescenza additiva in punti temporali successivi indica una continua perdita di integrità della membrana che si verifica in funzione della citotossicità contro le cellule rimanenti. Il colorante verde CellTox™ è stato aggiunto al momento della semina.
Multiplex con test di vitalità cellulare per ottenere dati più informativi per pozzetto
Misurare la citotossicità e la vitalità
In questo caso, il colorante verde CellTox™ è stato miscelato con le cellule K562, che sono state piastrate e poi dosate con il composto. Al termine dell'esposizione di 72 ore è stato aggiunto il reagente per il test di vitalità cellulare CellTiter-Glo® ed è stata misurata la luminescenza (vitalità). Queste due misure inverse della salute delle cellule hanno dato luogo a un accordo sull'EC50.
Determinare la tempistica appropriata delle analisi della caspasi
CellTox™ Green può essere utilizzato in modalità cinetica per determinare l'inizio della citotossicità, seguito dal multiplexing con il saggio Caspase-Glo® 3/7 Assay nello stesso pozzetto del campione per confermare l'attivazione della caspasi-3/7 al momento opportuno.
Distinguere tra effetti citotossici e citostatici
In questo esempio, le cellule K562 sono state esposte al metotrexato, un composto antiproliferativo, per 72 ore. Per determinare la citotossicità è stato aggiunto il colorante verde CellTox™, quindi il reagente CellTiter-Glo® è stato aggiunto allo stesso pozzetto per la determinazione della vitalità. Un'analisi della vitalità da sola avrebbe segnalato erroneamente il composto come citotossico a causa del minor numero di cellule nel campione trattato rispetto al controllo non trattato, che ha continuato a proliferare. Il multiplexing con un saggio di citotossicità non rivela alcun cambiamento nel segnale come risultato della compromissione dell'integrità della membrana, indicando l'inibizione della crescita e non la citotossicità.
Dopo diversi mesi di tentativi di sviluppare un robusto test di citotossicità cellulare, abbiamo sempre osservato un'elevata variabilità sull'asintoto superiore della curva dose-risposta. In base alle raccomandazioni di Promega, abbiamo sostituito il nostro precedente reagente per il rilevamento della citotossicità con il reagente CellTox™ Green Cytotoxicity, che ha risolto direttamente i nostri problemi. Il test basato sulle cellule è ora completamente validato con questo reagente nella nostra azienda.
Dr. Fabian Vandermeers, Sr R&D Technical Leader, Quality Assistance S.A.
Protocols
Complete Protocol
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
Lysis Solution |
G182B | 1 × 0.5ml |
|
Assay Buffer |
G610A | 1 × 10ml |
CellTox™ Green Dye, 1,000X |
G873A | 1 × 20μl |
SDS
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Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
Lysis Solution |
G182B | 1 × 0.5ml |
|
Assay Buffer |
G610B | 1 × 50ml |
CellTox™ Green Dye, 1,000X |
G873A | 5 × 20μl |
SDS
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What's in the box
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|---|---|---|
|
Lysis Solution |
G182B | 1 × 0.5ml |
|
Assay Buffer |
G610B | 2 × 50ml |
CellTox™ Green Dye, 1,000X |
G873B | 1 × 200μl |
SDS
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CellTox™ Green Dye, 1,000X |
G873B | 1 × 200μl |
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Resources
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