CellTiter-Glo® One Solution Assay
Luminescent Assay Measures Number of Viable Cells in Culture
- Frozen, ready-to-use assay eliminates several protocol steps
Catalog Number:
Size
Catalog Number: G8461
Catalog Number: G8462
Il saggio CellTiter-Glo® One Solution è un metodo omogeneo per determinare il numero di cellule vitali in coltura basato sulla quantificazione dell'ATP presente, che indica la presenza di cellule metabolicamente attive. Questo formato congelato e pronto all'uso si basa sulla chimica originale del CellTiter-Glo® Luminescence Cell Viability Assay ed elimina la necessità di combinare il tampone con il substrato liofilizzato durante la preparazione del reagente. Il saggio CellTiter-Glo® è progettato per l'uso con formati di piastre multipozzetto, il che lo rende ideale per lo screening automatizzato ad alta produttività (HTS) in formato da 96 a 1536 pozzetti e per i saggi di proliferazione cellulare e citotossicità.
Il formato omogeneo "add-mix-measure" determina la lisi delle cellule e la generazione di un segnale luminescente proporzionale alla quantità di ATP presente. La quantità di ATP è direttamente proporzionale al numero di cellule presenti nella coltura. Il saggio CellTiter-Glo® One Solution genera un segnale luminescente stabile di tipo "glow" con un'emivita superiore a tre ore. Questa emivita prolungata elimina la necessità di iniettori di reagenti e offre flessibilità per l'elaborazione continua o in modalità batch di più piastre.
Non è necessaria la preparazione dei reagenti: è sufficiente scongelare e "aggiungere-miscelare-misurare". Questo formato riduce il numero di fasi di manipolazione delle piastre. I dati possono essere registrati 10 minuti dopo l'aggiunta del reagente e il test misura le cellule a numeri inferiori ai limiti di rilevamento dei test colorimetrici e fluorimetrici standard.
I volumi sono comodi per le applicazioni HTS e il saggio può essere utilizzato con vari formati multipozzetto, tra cui piastre a 96 pozzetti, normali o a basso volume a 384 e 1536 pozzetti. I dati possono essere registrati mediante luminometro o dispositivo di imaging con telecamera CCD.
Il saggio CellTiter-Glo fornisce un segnale luminescente stabile con un'emivita >3 ore, a seconda del tipo di cellula e del terreno di coltura utilizzato, e può essere utilizzato con altri prodotti chimici di saggio non litici compatibili di Promega.
Note
G8461 è sufficiente per 1.000 test a 100µl per test in piastre a 96 pozzetti o per 4.000 test a 25µl per test in piastre a 384 pozzetti. Il numero di catalogo G8462 è sufficiente per 5.000 dosaggi a 100µl/die in piastre a 96 pozzetti o 20.000 dosaggi a 25µl/die in piastre a 384 pozzetti.
Il numero di cellule è correlato alla produzione di luminescenza.
Esiste una relazione diretta tra la luminescenza misurata con il saggio CellTiter-Glo® One Solution e il numero di cellule in coltura per oltre tre ordini di grandezza. Le diluizioni seriali di due volte di cellule Jurkat sono state effettuate in RPMI 1640 con 10BS e sono state piastrate in tre formati utilizzando un'apparecchiatura di dispensazione automatica. I volumi piastrati sono stati 100µl di cellule per pozzetto in una piastra a 96 pozzetti(pannello A), 10µl di cellule per pozzetto in una piastra a basso volume a 384 pozzetti(pannello B) e 4µl di cellule per pozzetto in una piastra a 1536 pozzetti(pannello C). In ogni pozzetto è stato dispensato un volume equivalente di soluzione CellTiter-Glo® One. La luminescenza è stata registrata 10 minuti dopo l'aggiunta della soluzione CellTiter-Glo® One. Esiste una relazione lineare (r2 > 0,99) tra il segnale luminescente e il numero di cellule in ciascun formato di piastra.
Protocols
Specifications
Catalog Number:
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
The CellTiter-Glo® One Solution Assay can also be stored at 4°C for 48 hours or at 22°C for 10 hours with ~10–12% loss of activity and can withstand two additional freeze-thaw cycles after the first thaw, with approximately 10% loss of activity with each additional freeze-thaw cycle.
SDS
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Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
The CellTiter-Glo® One Solution Assay can also be stored at 4°C for 48 hours or at 22°C for 10 hours with ~10–12% loss of activity and can withstand two additional freeze-thaw cycles after the first thaw, with approximately 10% loss of activity with each additional freeze-thaw cycle.
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