CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay
A Cell Viability Assay Validated for 3D Microtissue Cultures
- Accurate 3D cytotoxicity determination
- Easy assay implementation
- Simple, 30-minute protocol
Catalog Number:
Size
Catalog Number: G9681
Catalog Number: G9682
Catalog Number: G9683
Come funziona CellTiter-Glo 3D?
Il saggio CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay è stato progettato per determinare la vitalità cellulare in sferoidi di microtessuti 3D. Il reagente del saggio penetra negli sferoidi di grandi dimensioni e ha una maggiore capacità litica, consentendo una determinazione più accurata della vitalità rispetto ad altri metodi di analisi.
Basato sulla stessa chimica affidabile del classico CellTiter-Glo® Assay, questo nuovo reagente per il test 3D misura l'ATP come indicatore di vitalità e genera una lettura luminescente molto più sensibile dei metodi colorimetrici o a fluorescenza. Il semplice protocollo di 30 minuti e il reagente pronto all'uso consentono di ottenere risultati rapidi.
Scoprite come il saggio di vitalità cellulare 3D CellTiter-Glo® può essere utilizzato per valutare la tossicità dei farmaci negli organoidi.
Migliore recupero dell'ATP da sferoidi di microtessuto 3D più grandi
| Diametro dello sferoide (μm) | Test classico CellTiter-Glo® (pmol/microtessuto) | Test CellTiter-Glo® 3D (pmol/microtessuto) | Rapporto |
|---|---|---|---|
| 188 | 16 ± 4 | 17 ± 4 | 1.10 |
| 386 | 79 ± 3 | 94 ± 11 | 1.19 |
| 459 | 103 ± 2 | 126 ± 11 | 1.22 |
| 565 | 127 ± 3 | 178 ± 17 | 1.40 |
Migliore capacità litica
Migliore penetrazione del microtessuto 3D, dati di vitalità più accurati
Gli sferoidi del tumore del colon HCT116 sono stati generati seminando le cellule nella piattaforma a goccia sospesa InSphero GravityPLUS™ a 96 pozzetti e coltivati per 4 giorni.
Pannello A. A tutti i campioni è stato aggiunto un volume equivalente di reagente e, dopo 5 minuti di agitazione, la luminescenza è stata registrata a 30 minuti.
Pannello B. Una concentrazione 2X di CellTox™ Green Dye è stata aggiunta al reagente CellTiter-Glo® 3D (a sinistra) o al reagente ATPlite™ 1Step (a destra) prima dell'aggiunta del campione come indicatore della lisi cellulare e le immagini sono state acquisite a 30 minuti. Gli sferoidi nel pannello B hanno un diametro di ~300μm e le barre in ogni immagine rappresentano una distanza di 200μm.
Più sensibile rispetto ai test colorimetrici o fluorimetrici di vitalità cellulare
I segnali luminescenti del saggio CellTiter-Glo® 3D sono di ordini di grandezza superiori al fondo. Altri test di vitalità non litici che misurano le variazioni di fluorescenza (ad es. alamarBlue®) o di assorbanza (ad es. MTT) generano segnali solo modestamente superiori ai loro segnali di controllo senza cellule.
InSphero Insight™ microtessuti di fegato umano (~250μm). Tutti i micro tessuti sono stati analizzati utilizzando i saggi CellTiter-Glo® 3D, alamarBlue® e MTT secondo i protocolli del produttore. I tempi di analisi totali per i saggi CellTiter-Glo® 3D, alamarBlue® e MTT sono stati rispettivamente di 30 minuti, 3 ore e 8 ore.
Cellule di cancro del colon HCT116 seminate in una piattaforma a 96 pozzetti InSphero GravityPLUS™ e coltivate per generare ~340μm sferoidi.
Compatibile con una varietà di metodi di coltura 3D
Di seguito sono riportati i risultati dello screening dei composti utilizzando il saggio CellTiter-Glo® 3D in colture 3D a goccia, in piastra a bassissimo attacco (ULA) e in Matrigel®. Per tutti e tre i metodi sono stati ottenuti risultati equivalenti.
Le cellule di cancro del colon HCT116 sono state seminate come segue: 400 cellule in sospensione; 1.000 cellule in ULA o Matrigel®. I microtessuti sono stati coltivati per 4 giorni, trattati con i composti per 48 ore e quindi analizzati con il reagente CellTiter-Glo® 3D. La luminescenza è stata registrata a 30 minuti.
Il saggio CellTiter-Glo® 3D dimostra un'eccellente precisione
Esperimento sul fattore Z con microtessuti 3D
Quattrocento cellule di cancro del colon HCT116 sono state seminate in ciascuno dei 60 pozzetti di una piastra a goccia sospesa InSphero GravityPLUS™ a 96 pozzetti e incubate per 4 giorni per formare 60 sferoidi (diametro di ~350μm). Metà degli sferoidi sono stati trattati con panobinostat 100μM (quadrati neri) e l'altra metà è stata trattata con il veicolo (1 MSO, quadrati arancioni). Dopo 48 ore, tutti i campioni sono stati analizzati con il reagente CellTiter-Glo® 3D. Il saggio CellTiter-Glo® 3D ha fornito un fattore Z´ pari a 0,81.
Tools to Monitor Biology in 3D Culture
When working with 3D culture models, choosing the right assay system is crucial. Learn about tools to monitor biology in 3D culture.
Bioluminescence Resource Center
Learn more about how luminescence works, what makes it different from fluorescence and how you can use luminescence to fuel your own research.
Protocols
Complete Protocol
Quick Protocols
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
CellTiter-Glo® 3D Reagent |
G968A | 1 × 10ml |
SDS
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Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
CellTiter-Glo® 3D Reagent |
G968A | 10 × 10ml |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
CellTiter-Glo® 3D Reagent |
G968B | 1 × 100ml |
SDS
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Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
Resources
Articles
- Reproducible Drug Screening Assays Using Single Organoids
- Verifying Cell-Based Assays for Use with 3D Models
- Luminescent Viability Assays for Magnetically Bioprinted Hepatocyte Spheroids
- App Note: Predicting gastrointestinal toxicity
- Enhanced extrinsic apoptosis of therapy-induced senescent cancer cells using a death receptor 5 (DR5) selective agonist
- Lipidomics profiling reveals differential alterations after FAS inhibition in 3D colon cancer cell culture models
- ALDOC- and ENO2- driven glucose metabolism sustains 3D tumor spheroids growth regardless of nutrient environmental conditions: A multi-omics analysis
- High-pressure oxygen rewires glucose metabolism of patient-derived glioblastoma cells and fuels inflammasome response
- Delivery of a BET protein degrader via a CEACAM6-targeted antibody–drug conjugate inhibits tumour growth in pancreatic cancer models
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