CellTiter 96® Non-Radioactive Cell Proliferation Assay (MTT)

Il saggio di proliferazione cellulare non radioattivo CellTiter 96® è una raccolta di reagenti qualificati che fornisce un metodo conveniente per determinare il numero di cellule vitali. Il saggio CellTiter 96® è una modifica del metodo MTT descritto da Mosmann e incorpora diversi miglioramenti al metodo che risolvono precedenti problemi tecnici, tra cui: 1) la precipitazione delle proteine del siero causata dall'aggiunta di solvente organico; 2) l'interferenza del rosso fenolo; 3) la solubilizzazione incompleta dei cristalli di formazene con conseguente minore sensibilità; 4) la stabilità del prodotto colorato.

Il test CellTiter 96® viene eseguito aggiungendo una soluzione di colorante premiscelata e ottimizzata ai pozzetti di coltura di una piastra a 96 pozzetti, solitamente contenenti varie concentrazioni di fattore di crescita o sostanza in esame. Durante un'incubazione di 4 ore, le cellule vive convertono il componente di tetrazolio MTT della soluzione colorante in un prodotto formazan. Se attualmente si utilizza un saggio di incorporazione di^[3H]-timidina, l'aggiunta della soluzione colorante può essere sostituita dall'impulso di timidina radioattiva nel momento del saggio in cui viene solitamente aggiunto l'impulso di^[3H]-timidina. La soluzione di solubilizzazione/arresto viene quindi aggiunta ai pozzetti di coltura per solubilizzare il prodotto formazan e l'assorbanza a 570 nm viene registrata con un lettore di piastre a 96 pozzetti. Inoltre, il confronto diretto tra l'incorporazione di^[3H]-timidina e la conversione del tetrazolio ha dimostrato una differenza inferiore a 5 tra i due saggi per la determinazione del contenuto di fattori di crescita in diversi campioni.

Caratteristiche e vantaggi

Maggiore sensibilità: Rilevamento di appena 1.000 cellule/pozzetto con un lettore di piastre a 96 pozzetti. Maggiore sensibilità rispetto alla procedura del saggio al rosso neutro.

Utilizzo con una varietà di cellule: Test su cellule di mammifero, pianta e lievito.

Non radioattivo: Non richiede cocktail di scintillazione o smaltimento di rifiuti radioattivi.

Risparmio di tempo: Esecuzione del test in una piastra a 96 pozzetti senza fasi di lavaggio, raccolta delle cellule e conteggio della scintillazione.

Conveniente e adattabile alle vostre esigenze: Non richiede la pesatura o la miscelazione dei composti coloranti e segue un protocollo di 4 ore o di una notte.