BacTiter-Glo™ Microbial Cell Viability Assay

Il BacTiter-Glo™ Microbial Cell Viability Assay fornisce un metodo per determinare il numero di cellule microbiche vitali in coltura basato sulla quantificazione dell'ATP presente. Il test omogeneo prevede l'aggiunta di un singolo reagente (BacTiter-Glo™ Reagent) direttamente alle cellule batteriche coltivate in terreno e la misurazione della luminescenza. Questo formato di analisi riduce gli errori di pipettaggio che possono essere introdotti durante le molteplici fasi richieste da altri metodi di misurazione dell'ATP.

La formulazione del reagente favorisce la lisi delle cellule batteriche e la generazione di un segnale luminescente. Il segnale luminescente è proporzionale alla quantità di ATP presente, che è direttamente proporzionale al numero di cellule vitali in coltura. Il saggio si basa sulle proprietà di una luciferasi termostabile proprietaria (Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase) e su una formulazione tampone proprietaria per l'estrazione dell'ATP dai batteri. È stato dimostrato che il test è in grado di rilevare una varietà di batteri e funghi.

I dati possono essere registrati in 5 minuti o meno dopo l'aggiunta del reagente e la miscelazione. La sensibilità superiore del test consente di rilevare la crescita o la tossicità rapidamente dopo l'inoculazione.

L'ATP può essere misurato da appena 10 cellule batteriche e i dati vengono registrati tramite luminometro o telecamera CCD. Il test è 1.000 volte più sensibile di quelli che richiedono letture di assorbanza. Il segnale luminescente di tipo "glow" è stabile con un'emivita generalmente superiore a 30 minuti.

Le applicazioni del saggio comprendono l'esame dell'attività di composti antimicrobici, lo screening di composti antimicrobici, l'esame della crescita batterica con sensibilità e intervallo estesi, la quantificazione rapida dei batteri e il rilevamento rapido dell'ATP.

Note:
Utilizzando 100μl di reagente BacTiter-Glo™ per ogni test in un formato a 96 pozzetti, la Cat. G8230 fornisce reagenti sufficienti per eseguire 100 test; le Cat. G8231 e G8232, 1.000 test; la Cat. G8233, 10.000 test. Utilizzando 25μl di reagente BacTiter-Glo™ per ogni test in un formato a 384 pozzetti, il formato G8230 fornisce reagenti sufficienti per eseguire 400 test; i formati G8231 e G8232, 4.000 test; il formato G8233, 40.000 test. rATP (Cat.# P1132) deve essere acquistato separatamente per eseguire una curva standard.