Saggi di vitalità cellulare e citotossicità
Offriamo una vasta gamma di saggi e reagenti per determinare la vitalità cellulare e la citotossicità in colture cellulari monostrato, microtessuti 3D, cellule primarie, cellule staminali, colture batteriche e cellule infettate da virus. Molti dei saggi di vitalità cellulare e citotossicità Promega possono essere multiplexati con l'apoptosi e altri saggi per determinare il meccanismo di morte cellulare e confrontare sensibilmente i dati da pozzetto a pozzetto, da piastra a piastra e giorno per giorno.
I saggi di vitalità cellulare e citotossicità si basano su sistemi chimici di rilevamento colorimetrici, fluorimetrici e bioluminescenti. I saggi in tempo reale, a cellule vive, monitorano ripetutamente nel tempo e generano più punti di dati da un singolo pozzetto di analisi. I saggi endpoint possono fornire formati di analisi sensibili e ad alta produttività per determinare la salute delle cellule.
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Introduzione ai test di vitalità e citotossicità cellulare
I saggi di vitalità cellulare e citotossicità misurano i cambiamenti cellulari o metabolici associati a cellule vitali o non vitali. Questi test possono rilevare cambiamenti strutturali come la perdita di integrità della membrana in caso di morte cellulare o attività fisiologiche e biochimiche indicative di cellule vive.
Il gold standard, e il saggio di vitalità cellulare più sensibile, è il CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay, che misura l'ATP intracellulare. I test ATP lisciviano rapidamente la cellula, forniscono inibitori dell'ATPasi e forniscono i componenti della reazione luciferasica. La produzione di luce è proporzionale al numero di cellule vitali.
Promega offre anche saggi di vitalità colorimetrici, a fluorescenza e a bioluminescenza, basati sul potenziale di riduzione di una cellula vitale. Questi includono opzioni di analisi colorimetriche (CellTiter 96® AQueous One Solution), fluorescenti (CellTiter-Blue® Viability Assay) e bioluminescenti (RealTime-Glo® MT Cell Viability Assay). Il RealTime-Glo® MT Cell Viability Assay è un saggio non litico che monitora continuamente la vitalità cellulare nel tempo in base al potenziale di riduzione della cellula.
I test di citotossicità misurano i parametri associati alla perdita di integrità della membrana al momento della morte cellulare. I test di citotossicità possono rilevare proteine citosoliche che non dovrebbero essere rilasciate dalla cellula, a meno che la cellula non abbia perso l'integrità della membrana e le proteine siano fuoriuscite dalla cellula. Il rilascio di lattato deidrogenasi (LDH) è una misura ben accettata della morte cellulare, che può essere rilevata con il saggio bioluminescente LDH-Glo®. Il saggio CytoTox-Fluor® utilizza un substrato peptidico fluorogenico per misurare l'attività di "proteasi a cellule morte" rilasciata da cellule che hanno perso l'integrità della membrana. In alternativa, i saggi di citotossicità possono rilevare la capacità dei coloranti impermeabili alle cellule di entrare nelle cellule dopo la perdita dell'attività di membrana. CellTox™ Green è un colorante fluorescente che lega il DNA alla morte cellulare e genera un segnale stabile che può essere misurato in saggi di citotossicità in tempo reale.
