Il saggio RealTime-Glo™ Annexin V Apoptosis and Necrosis Assay misura l'esposizione in tempo reale della fosfatidilserina (PS) sul foglietto esterno delle membrane cellulari durante il processo apoptotico. Le proteine di fusione dell'Annexin V luciferasi fornite nel reagente del saggio si legano alla PS durante l'apoptosi precoce e vengono rilevate con un semplice segnale di luminescenza. Il reagente del test include anche un colorante che lega il DNA, che entra nella cellula e genera un segnale fluorescente alla perdita dell'integrità della membrana.
La combinazione e la tempistica dei segnali luminescenti (legame con l'annessina V) e fluorescenti (rilascio del DNA) viene utilizzata per differenziare la necrosi secondaria che si verifica durante l'apoptosi tardiva dalla necrosi causata da altri eventi citotossici.
Il test RealTime-Glo™ per l'apoptosi e la necrosi dell'Annexina V non è litico e il semplice metodo “ add-and-read” consente letture multiple da un singolo pozzetto del test. L'apoptosi può essere monitorata in tempo reale, senza bisogno di piastre multiple, di un'elaborazione complicata o di apparecchiature di rilevamento specializzate. L'unico strumento necessario è un lettore multimodale in grado di rilevare luminescenza e fluorescenza.