Il sistema TUNEL colorimetrico DeadEnd™ fornisce i reagenti per eseguire l'etichettatura dUTP nick-end mediata da deossinucleotidil transferasi terminale (TUNEL) del DNA nucleare frammentato per valutare l'apoptosi in situ a livello di singola cellula in sezioni di tessuto o cellule coltivate. Il nucleotide biotinilato viene incorporato alle estremità 3´-OH del DNA frammentato utilizzando la deossinucleotidil transferasi terminale (TdT). La streptavidina marcata con perossidasi di rafano (Streptavidin HRP) si lega quindi a questi nucleotidi biotinilati, che vengono rilevati con il cromogeno stabile, la diaminobenzidina (DAB). Con questa procedura, i nuclei apoptotici vengono colorati di marrone scuro e visualizzati al microscopio ottico.
Caratteristiche e vantaggi
- Rileva l'apoptosi in sezioni di tessuto spesse o valuta la morfologia cellulare.
- Il test include il reagente DAB per la rilevazione del colore e coprioggetti in plastica che semplificano la manipolazione dei campioni.
- Le applicazioni comprovate includono sezioni Vibratome® di tessuto neuronale, cellule Jurkat, cellule HL-60.
Nota: Il protocollo per il test TUNEL DeadEnd™ raccomanda un trattamento opzionale con DNasi I dei campioni come controllo positivo per rilevare la frammentazione del DNA. Per generare il controllo positivo si può usare la DNasi RQ1 RNase-Free (Cat.# M6101), disponibile separatamente.
Protocols
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size | Available Separately |
|---|---|---|---|
|
Plastic Coverslips |
G326B | 1 × 20 each | |
|
Equilibration Buffer |
G327B | 1 × 4.8ml | |
|
SSC, 20X |
G329B | 1 × 20ml | |
|
Streptavidin HRP |
G714A | 1 × 40μl | |
|
Biotinylated Nucleotide Mix |
G715A | 1 × 20μl | |
|
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (recombinant) |
M828B | 1 × 600u | |
|
Proteinase K |
V302A | 1 × 10mg | View Product |
DAB 10X Chromogen |
J293A | 1 × 400μl | |
DAB Substrate 1X Buffer |
J294A | 1 × 3.6ml |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
See Protocol for detailed storage recommendations.
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size | Available Separately |
|---|---|---|---|
|
Plastic Coverslips |
G326B | 2 × 20 each | |
|
Equilibration Buffer |
G327C | 1 × 9.6ml | |
|
SSC, 20X |
G329A | 1 × 70ml | |
|
Streptavidin HRP |
G714A | 1 × 40μl | |
|
Biotinylated Nucleotide Mix |
G715A | 2 × 20μl | |
|
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (recombinant) |
M828B | 2 × 600u | |
|
Proteinase K |
V302A | 1 × 10mg | View Product |
DAB 10X Chromogen |
J293A | 1 × 400μl | |
DAB Substrate 1X Buffer |
J294A | 1 × 3.6ml |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
See Protocol for detailed storage recommendations.
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