Il test fornisce un substrato proluminogenico della caspasi-8 in un sistema tampone ottimizzato per l'attività della caspasi, l'attività della luciferasi e la lisi cellulare. L'aggiunta di un singolo reagente Caspase-Glo® 8 in un formato "add-mix-read" determina la lisi cellulare, seguita dalla scissione del substrato da parte della caspasi e dalla generazione di un segnale luminescente di tipo "glow". Il segnale generato è proporzionale alla quantità di attività caspasica presente. Il reagente Caspase-Glo® si basa sulle proprietà di una luciferasi termostabile proprietaria (Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase), che genera un segnale luminescente stabile di tipo "glow" e migliora le prestazioni in un'ampia gamma di condizioni di analisi.
Il sistema include ora una fiala separata di inibitore della proteasi, MG-132 Inhibitor, che può essere utilizzata per ridurre il background, migliorando così le prestazioni del saggio Caspase-Glo® 8 in applicazioni basate su cellule.
Caratteristiche e vantaggi
- La bassa luminescenza di fondo consente di ottenere un eccellente rapporto segnale/rumore e una sensibilità superiore non ottenuta da altri formati di caspasi, consentendo di eseguire i saggi in formati a 96 o 384 pozzetti.
- Non è richiesta alcuna preparazione o manipolazione del campione e non sono necessari tempi di incubazione prolungati come per i test basati sulla fluorescenza. La massima sensibilità si ottiene in appena 0,5-1 ora.
- Fornisce eccellenti fattori Z´ in modelli cellulari e di enzimi purificati.
Note: Utilizzando 100μl di Reagente Caspase-Glo® per ogni test in un formato a 96 pozzetti, la Cat.# G8200 fornisce reagenti sufficienti per eseguire 25 test; la Cat.# G8201, 100 test; la Cat.# G8202, 1.000 test. Utilizzando 25μl di Reagente Caspase-Glo® per test in un formato a 384 pozzetti, la Cat.# G8200 fornisce reagenti sufficienti per eseguire 100 test; la Cat.# G8201, 400 test; la Cat.# G8202, 4.000 test.