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Caspase Activity Assay for Apoptosis Detection

  • High sensitivity caspase assay—requires fewer cells and less enzyme
  • Simple add-mix-measure protocol—no sample preparation needed
  • Easily scalable to 96-, 384- and 1,536-well plate formats
  • Integrates seamlessly with the MyGlo® Reagent Reader

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Il test omogeneo misura l'attività della Caspasi-3/7

Il saggio Caspasi-Glo® 3/7 fornisce un substrato proluminescente di caspasi-3/7 DEVD-aminoluciferina e una luciferasi termostabile proprietaria in un reagente ottimizzato per l'attività della caspasi-3/7, l'attività della luciferasi e la lisi cellulare. L'aggiunta del singolo reagente Caspase-Glo® 3/7 in un formato "add-mix-measure" si ottiene la lisi cellulare, seguita dalla scissione del substrato da parte della caspasi. Questo libera l'aminoluciferina libera, che viene consumata dalla luciferasi, generando un segnale luminescente "tipo glow", proporzionale all'attività della caspasi-3/7.

La luciferasi stabilizzata e il sistema tampone proprietario migliorano le prestazioni del test in un'ampia gamma di condizioni di analisi e il test è meno soggetto all'interferenza dei composti rispetto ai test basati sulla fluorescenza o sulla colorimetria. Il saggio dell'attività della caspasi è stato progettato per l'uso con formati di piastre multipozzetto che utilizzano l'enzima purificato o cellule in coltura e può essere multiplexato con altri saggi basati sulle cellule.  Il saggio fornisce eccellenti valori del fattore Z´ in modelli cellulari e di enzima purificato.

caspase 3 activity assay mechanism 9555ma-01

Avete bisogno di misurare l'attività delle caspasi in colture 3D? Scoprite il nostro nuovo test Caspase-Glo® 3/7 3D!

Per saperne di più

Semplice rilevamento bioluminescente dell'attività della caspasi

Caspase 3 activity assay protocol 4059ma03-3b

La luminescenza è lineare in un'ampia gamma di numeri di cellule

example caspase 3 assay results 4098MB-W

Jurkat cells were treated with anti-Fas mAb for 4.5 hours to induce apoptosis or were left untreated. Caspase-Glo® 3/7 Reagent was added directly to the cells in 96-well plates and incubated for 1 hour before recording luminescence. Each point represents the average of 4 wells. The "no cell" blank control value has been subtracted from each.


Measure Dose Response to Apoptosis Inducers

Dose-response graph showing an apoptotic response to bortezomib with no apoptotic response to palbociclib.

Jurkat cells were seeded at 10,000 cells/well and treated for 20 hours with two compounds. Caspase-Glo® 3/7 Reagent was added to the cells and luminescence measured on the MyGlo® Reagent Reader. The dose-response graph shows an apoptotic response to bortezomib with no apoptotic response to palbociclib.


Caspasi 3/7 Multiplex con test di citotossicità e vitalità cellulare

caspase-glo-3-7-multiplex-10651mb-w
Le cellule Jurkat (10.000 cellule/pozzetto) sono state trattate con staurosporina diluita in serie. La vitalità cellulare, la citotossicità e l'apoptosi sono state valutate dopo 6 ore utilizzando il saggio ApoTox-Glo™ Triplex Assay, con la chimica del saggio Caspase-Glo® 3/7 Assay. Per tutti i punti dati è stata calcolata la variazione di ripiegamento rispetto al controllo delle cellule non trattate (concentrazione = 0M).

Note

Utilizzando 100μl di Reagente Caspase-Glo® per test in un formato a 96 pozzetti, il Cat.# G8090 fornisce reagenti sufficienti per eseguire 25 test di attività caspasi; il Cat.# G8091, 100 test; i Cat.# G8092 e G8093, 1.000 test. Utilizzando 25μl di Reagente Caspase-Glo® per test in un formato a 384 pozzetti, il Cat.# G8090 fornisce reagenti sufficienti per eseguire 100 test di attività delle caspasi; Cat.# G8091, 400 test; Cat.# G8092 e G8093, 4.000 test.

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Caspase-Glo® 3/7 Buffer

G810C 1 × 2.5ml

Caspase-Glo® 3/7 Substrate

G811C 1 × 1 bottle

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Caspase-Glo® 3/7 Buffer

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Caspase-Glo® 3/7 Substrate

G811A 1 × 1 bottle

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Caspase-Glo® 3/7 Buffer

G810A 10 × 10ml

Caspase-Glo® 3/7 Substrate

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Caspase-Glo® 3/7 Buffer

G810B 1 × 100ml

Caspase-Glo® 3/7 Substrate

G811B 1 × 1 bottle

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MyGlo™ Reagent Reader

  • USB Cable
  • Wall Power Adapter
  • Plug Adapters
MG1000 1 × 1 each

CellTiter-Glo® 2.0 Reagent

G9241 1 × 10ml View Product

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