Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay

Il saggio Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay fornisce i reagenti necessari per una misurazione rapida e sensibile delle caspasi-3 e -7 attive in un formato omogeneo. Il saggio comprende un substrato consensuale profluorescente per la caspasi-3/7, la rodamina 110 bis-(N-CBZ-l-aspartyl-l-glutamyl-l-valyl-aspartic acid amide) (Z-DEVD-R110), e un tampone bifunzionale ottimizzato per la lisi/attività cellulare. Il tampone liscia in modo efficiente le cellule di mammifero in coltura e supporta un'attività enzimatica ottimale della caspasi-3/7. Il substrato e il tampone sono combinati per formare il reagente Apo-ONE® Caspase-3/7 che viene aggiunto direttamente ai campioni. Al momento del clivaggio sul lato C-terminale del residuo aspartato nella sequenza del substrato peptidico DEVD da parte degli enzimi caspasi-3/7, la rodamina 110 diventa fluorescente se eccitata a una lunghezza d'onda di 498 nm. Il massimo di emissione è 521 nm. La quantità di prodotto fluorescente generato è rappresentativa della quantità di caspasi-3/7 attiva presente nel campione.

Caratteristiche e vantaggi

Risultati più rapidi: Il semplice formato "aggiungi-mescola-misura", combinato con l'elevata sensibilità del test, riduce drasticamente il "tempo per ottenere il primo risultato", eliminando la complessa preparazione del campione e le lunghe fasi di incubazione.

Utilizzare meno enzima o meno cellule: Il tampone ottimizzato per l'attività della caspasi-3/7, insieme al substrato marcato con R110, consente di aumentare la sensibilità rispetto ai metodi di analisi della caspasi fluorescente esistenti.

Adattamento alle esigenze di formato e produttività: Il saggio può essere configurato in modo flessibile (dalla cuvetta alla piastra da 384 pozzetti) per l'uso in sistemi ad alta produttività mantenendo un rapporto 1:1 tra campione e reagente del saggio e può essere utilizzato con preparazioni enzimatiche purificate, estratti cellulari o colture di cellule aderenti, in sospensione o primarie.

Ulteriori informazioni: Eseguire più di un test sullo stesso campione. Questo test può essere multiplexato con altri metodi di analisi come il test CellTiter-Blue® (cat. G8080) o i test Caspase-Glo® 8 o 9 (cat. G8200 o G8210).

Utilizzando 100μl di Apo-ONE® Reagent per ogni test in un formato a 96 pozzetti, il Cat.# G7792 fornisce reagenti sufficienti per eseguire 10 test; il Cat.# G7790, 100 test; il Cat.# G7791, 1.000 test. Utilizzando 25μl di Reagente Apo-ONE® per test in un formato a 384 pozzetti, la Cat.# G7792 fornisce reagenti sufficienti per eseguire 40 test; la Cat.# G7790, 400 test; la Cat.# G7791, 4.000 test.