P450-Glo™ CYP1B1 Assay System

Il saggio P450-Glo™ CYP1B1 fornisce un metodo omogeneo e luminescente per misurare l'attività del citocromo P450 CYP1B1. Il saggio impiega substrati luminogenici di P450 che sono derivati della luciferina di coleottero, un substrato per gli enzimi luciferasi. I derivati non sono substrati per la luciferasi, ma vengono convertiti dalle P450 in luciferina, che a sua volta reagisce con la luciferasi per produrre luce direttamente proporzionale all'attività della P450.

Questo saggio luminescente presenta una sensibilità straordinaria, bassi segnali di fondo e un'ampia gamma dinamica. Genera un segnale luminescente di tipo "glow", prodotto utilizzando luciferine derivatizzate come substrati del P450 e una luciferasi ricombinante stabilizzata (Ultra-Glo™ Luciferase) accoppiata a un sistema tampone proprietario. L'emivita dell'emissione luminescente è superiore a due ore, eliminando la necessità di luminometri con iniettori e consentendo l'elaborazione di piastre in batch. Il formato luminescente elimina anche la necessità di analisi lunghe come l'HPLC.

I substrati a base di luciferina sono prontamente assorbiti dalle cellule e rapidamente convertiti in luciferina all'interno della cellula, il che riduce il tempo di incubazione richiesto (in genere 30–60 minuti). Altri vantaggi del P450-Glo™ CYP1B1 Assay includono una formulazione che riduce al minimo l'incidenza di falsi positivi dovuti all'inibizione della luciferasi da parte degli analiti durante lo screening degli inibitori del citocromo P450. I valori di Z´ superiori a 0,8 si ottengono nei formati di piastra a 96 o 384 pozzetti e conferiscono risultati altamente predittivi.