Saggi sulla salute cellulare

I saggi sulla salute cellulare vengono utilizzati per rilevare e monitorare diversi eventi cellulari e costruire un quadro di come e perché le cellule vivano o muoiano. Questi saggi coprono diverse applicazioni, tra cui la valutazione della tossicità di candidati farmaci e altri composti, l'analisi dei cambiamenti cellulari nel cancro e in altre malattie e lo studio della biologia cellulare di base.

I fattori importanti da considerare nella scelta di un saggio sulla salute cellulare includono il parametro che si desidera misurare, la sensibilità necessaria, il sistema modello che si sta utilizzando, l'endpoint desiderato, il numero di campioni e l'apparecchiatura o la strumentazione di rilevamento necessaria.

Esistono saggi di salute cellulare che rilevano il numero di cellule vive (saggi di vitalità), il numero di cellule morte (saggi di citotossicità) e per valutare il meccanismo di morte cellulare (saggi di apoptosi). I saggi di vitalità cellulare e di citotossicità confermano facilmente la differenza tra assenza di trattamento e trattamento dei pozzetti sperimentali. Ulteriori saggi, come l'attivazione della caspasi o l'esposizione alla fosfatidil serina, o il multiplexing di più saggi di salute cellulare, aiutano a chiarire ulteriori informazioni sull'impatto del trattamento sulle cellule. Oltre alla proliferazione o alla citotossicità, l'apoptosi, la necrosi e le risposte citostatiche possono essere valutate con saggi di salute cellulare.

Le cellule in coltura sono solo un sistema modello e sono diverse dalle cellule nel loro normale ambiente in vivo. Le colture cellulari 3D imitano più da vicino le condizioni in vivo, ma possono presentare delle sfide per la progettazione degli esperimenti. I reagenti per i kit possono avere difficoltà a raggiungere il centro di grandi microtessuti 3D, così come i test litici possono non essere in grado di distruggere tutte le cellule all'interno del sistema 3D. Se si utilizzano colture 3D, la scelta migliore sarà quella di prodotti e protocolli di analisi ottimizzati per i sistemi 3D.

Il formato di analisi per la salute cellulare include endpoint e real-time. I saggi endpoint forniscono un'istantanea di ciò che sta accadendo a livello cellulare e sono adatti alle applicazioni in cui si conosce il tempo di risposta al trattamento, mentre quelli in real-time forniscono misurazioni ripetute nel tempo dello stesso campione, sono utili per comprendere il decorso temporale di una risposta e conservano cellule e campioni.