TMB Stabilized Substrate for Horseradish Peroxidase

Il substrato stabilizzato TMB è un substrato di sviluppo del colore TMB (3,3´, 5,5´-tetrametilbenzidina) stabile e pronto all'uso per la localizzazione di anticorpi coniugati con perossidasi di rafano su dot blot e Western blot. È più facile da usare rispetto al 4-cloro-1-naftolo (CN), che deve essere preparato immediatamente prima dell'uso. Il substrato TMB stabilizzato viene fornito premiscelato e completamente diluito in un tampone proprietario contenente meno dello 0,5% di solvente organico.

Il substrato stabilizzato con TMB è almeno tre volte più sensibile del 4-cloro-1-naftolo (CN); sono stati rilevati appena 412 g di β-galattosidasi sul blot con TMB, rispetto a 1,12 g sul blot con CN, quando è stato rilevato con un anticorpo specifico per β-galattosidasi e un anticorpo secondario coniugato con HRP. Il colore è molto più stabile del 4-cloro-1-naftolo e si fotografa più facilmente.

Nota: non è raccomandato per l'uso con ELISA.

1. Larson, G. (1992) Promega Notes 39, 17–18.
2. Cullinane, A. et al. (2007) Diagnosi dell'anemia infettiva equina durante l'epidemia del 2006 in Irlanda. Vet. Rec. 161, 647–52.
3. Tetteh, K.K.A. et al. (2005) Un esteso polimorfismo antigenico all'interno della sequenza di ripetizione della proteina di superficie 1 blocco 2 del merozoita di Plasmodium falciparum è incorporato in un immunogeno minimo polivalente. Infect. Immun. 73, 5928–35.
4. Stenbak, C.R. e Linial, M.L. (2004) Role of the C terminus of foamy virus Gag in RNA packaging and pol expression. J. Virol. 78, 9423–30.
5. Mello, K. et al. (2002) Una famiglia di multigeni che interagisce con il terminale amminico di MSP-1 del plasmodium identificata con il sistema yeast two-hybrid. Eukaryot. Cell 1, 915–25.

Western blot (immunoblot) for β-actin in cytoplasmic lysate from HEK293T cells.