ApoLive-Glo™ Multiplex Assay
Measure Viability and Apoptosis in the Same Sample Well
- Accurately determine mechanism of cell death in less time, with less sample
- Easy to implement using a simple sequential 'add-mix-measure' protocol
- Adaptable to meet various throughput needs
Catalog Number:
Size
Catalog Number: G6410
Catalog Number: G6411
Due tecnologie combinate in un unico test efficace
L'ApoLive-Glo™ Multiplex Assay misura sia il numero di cellule vitali come marcatore di citotossicità sia l'attivazione della caspasi come marcatore di apoptosi all'interno di un singolo pozzetto di analisi per determinare il meccanismo di morte cellulare. La prima parte del test misura l'attività di una proteasi marcatrice della vitalità cellulare. L'attività della proteasi a cellule vive è limitata alle cellule vitali intatte e viene misurata utilizzando un substrato peptidico fluorogenico, permeabile alle cellule (glicil-fenilalanil-ammino-fluorocumarina; GF-AFC). Il substrato entra nelle cellule intatte, dove viene scisso dall'attività della proteasi a cellula viva per generare un segnale fluorescente proporzionale al numero di cellule vive. La proteasi a cellula viva diventa inattiva quando si perde l'integrità della membrana cellulare e si disperde nel terreno di coltura circostante.
La seconda parte del test utilizza la tecnologia Caspase-Glo® Assay per rilevare l'attivazione della caspasi, un biomarcatore chiave dell'apoptosi. Il Caspase-Glo® Assay fornisce un substrato luminogenico per la caspasi-3/7, che contiene la sequenza tetrapeptidica DEVD, in un reagente ottimizzato per l'attività della caspasi, l'attività della luciferasi e la lisi cellulare. L'aggiunta del reagente Caspase-Glo® 3/7 in un formato "add-mix-measure" provoca la lisi cellulare, seguita dalla scissione del substrato da parte della caspasi e dalla generazione di un segnale luminescente di tipo "glow" prodotto dalla luciferasi. La luminescenza è proporzionale alla quantità di attività caspasica presente.
Misure predittive di vitalità e apoptosi nello stesso pozzetto del campione
Ionomycin treatment of Jurkat cells for 6 hours results in dose-dependent decrease in viability and increase in cytotoxicity with no caspase-3/7 activation, consistent with primary necrosis.
ApoTox-Glo™ Triplex Assay with suspension Jurkat cells treated with staurosporine. Staurosporine treatment for 6 hours results in a dose-dependent decrease in viability and increase in cytotoxicity with an increase in caspase-3/7 activity consistent with apoptosis.
Protocols
Complete Protocol
Quick Protocols
Specifications
Catalog Number:
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
GF-AFC Substrate |
G608A | 1 × 10μl |
|
Assay Buffer |
G610A | 1 × 10ml |
|
Caspase-Glo® 3/7 Buffer |
G810A | 1 × 10ml |
|
Caspase-Glo® 3/7 Substrate |
G811A | 1 × 1 bottle |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
What's in the box
| Item | Part # | Choose a size |
|---|---|---|
|
GF-AFC Substrate |
G608B | 1 × 50μl |
|
Assay Buffer |
G610A | 2 × 10ml |
|
Caspase-Glo® 3/7 Buffer |
G810A | 5 × 10ml |
|
Caspase-Glo® 3/7 Substrate |
G811A | 5 × 1 bottle |
SDS
Search for SDSCertificate of Analysis
Use Restrictions
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Storage Conditions
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